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BRAF基因突变检测试剂盒

 

【产品介绍】

BRAF基因突变在大约15%的癌症中发现，包括甲状腺癌、恶性黑色素瘤、大肠癌等，是新的基因治疗靶点，并于预后紧密相关。BRAF基因编码的丝/苏氨酸特异性激酶，是RAS/RAF/MEK/ERK/MAPK通路的重要转导因子，参与调控细胞的分化凋亡等。

BRAF突变主要有两种类型，发生在exon11上的甘氨酸环或exon15的激活区。Exon15的突变约有90%是V600E突变，1799位碱基由T变成了A。BRAF V600E突变在约45%的甲状腺乳头状癌被检出，在结直肠癌个BRAF的突变率约在15%，90%以上是V600E突变。此外，BRAF基因突变是恶性黑色素瘤和结直肠癌预后不良的重要因素有关，是结直肠癌药物（如西妥昔单抗）的药物反应标志. BRAF基因突变检测对于大肠癌和甲状腺癌诊断和预后的药物反应是必要的。

 

【检测原理】

PNA Clamp™ BRAF突变检测试剂盒是基于PNA的实时PCR Clamp™技术。该技术依赖PNA探针的两个重要特性。第一，PNA只能与完全配对的互补DNA链杂交。只要出现突变，即使是单一碱基错配，PNA就不能与互补的DNA链结合。第二，PNA的寡聚体本身不能被DNA聚合酶识别，从而不会充当PCR引物。它仅作为一个序列选择工具，阻止随后野生型的PCR扩增。

如果模板中目的基因发生了突变并因此出现了错配，使得DNA/PNA双链结合不稳定，这样DNA模板链就可以正常扩增，使发生突变的样本在实时PCR中得到阳性扩增产物，而野生型基因的扩增受到抑制。

 

 

【适用样本】

     Ø石蜡包埋组织样本  

        

         Ø胸腔积液

 

         Ø新鲜血浆

           

    Ø细胞学样本

 

         Ø新鲜组织活体组织切片

 

【实验流程】

 

 【仪器要求】                                                          

公司 型号 Bio-Rad  CFX 96 Roche Light cycler 480Ⅱ Qiagen Rotor-Gene Q ABI ABI7500 ABI ABI7900

 

 【技术特点】

Ø操作简便快捷——通过实时荧光PCR+PNA Clamp技术，2h即可获得多达数十个样本的检测结果。

 

Ø专利技术——采用PANAGENE公司先进的PNA Clamp技术，检测效果优于传统测序法和ARMS法等。

 

Ø灵敏度高——能测出0.1-1%的DNA突变。

 

Ø选择性好——可在混有野生型基因组DNA情况下，检测出1-0.1％的突变基因，是测序方法的25倍-250倍。

 

【订购信息】  

产品名称	货号		规格
BRAF突变检测试剂盒	PNAC-2001		50Tests/盒

 【参考文献】

1. Choi et al., Frequency of KRAS, BRAF, and PIK3CA mutations in advanced colorectal cancers: Comparison of peptide nucleic acid-mediated PCR and direct sequencing in formalin-fixed, paraffin-embedded tissue. Pathol Res Pract 207 (12):762-8, 2011.

2. Yoon et al., K-ras Gene Mutation in Non-Small Cell Lung Cancer. J Lung Cancer 1(1):55-59, 2002.

3. Beau-Faller et al., Detection of K-Ras mutations in tumour samples of patients with non-small cell lung cancer using PNA-mediated PCR clamping. British Journal of Cancer 100(6): 985 – 992, 2009.

4. Chang et al., Fast simultaneous detection of K-RAS mutations in colorectal cancer. BMC cancer 9:179, 2009.

5. Dabritz et al., Detection of Ki-ras mutations in tissue and plasma samples of patients with pancreatic cancer using PNA-mediated PCR clamping and hybridisation probes. British Journal of Cancer 92(2): 405-412, 2005.

6. Behn et al., Facilitated detection of oncogene mutations from exfoliated tissue material by a PNA-mediated `enriched PCR' protocol. J. Pathol 190(1):69-75, 2000.

7. Hilger et al., The Ras-Raf-MEK-ERK Pathway in the Treatment of Cancer. Onkologie 25(6): 511-518, 2002.

8. Bachireddy et al., Getting at MYC through RAS. Clin Cancer Res 11(12):4278-4281, 2005.