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首页 > 移植配型及相关 > one Lambda产品
美国One Lambda公司是HLA领域中历史最久、规模最大、技术力量最雄厚的企业,主要产品包括:单克隆抗体配型试剂、HLA单抗干板、DNA检测试剂盒、PRA检测试剂盒和HLA领域各种专用仪器、试剂、磁珠、计算机分析软件等。近年来One Lambda公司与中国的交流不断加深,目前在中国器官移植领域建立了多个合作实验室,并同HLA领域的专家、技术人员建立了广泛的联系。有CFDA认证。
淋巴毒检测
产品原理
早在1956年Dr.Gorer等创建的补体依赖的淋巴细胞毒试验检测方法,用于检测小鼠同体抗体。1964年美国UCLA Dr.Terasaki等将此方法几经改良,并使之微量化后应用到HLA血清学检测实验中。本方法操作简便,结果可靠,重复性好,从方法学上为HLA的血清学研究敞开了大门。此方法沿用至今,成为一项被美国国立卫生研究院(NIH)认可的国际通用的标准技术,称之为“标准血清学分型方法(standard serology)”。HLA细胞毒抗体属于免疫球蛋白IgG和IgM类型的抗体。此抗体在补体存在的情况下,能够结合到带有相应抗原的活淋巴细胞膜表面上,可以用数种方法观察此结果,其中最简单的方法是采用染色法(常用伊红或锥蓝)。染料进入死细胞后使死细胞体积增大并着色称为阳性结果,而活细胞不被着色成为阴性结果。一般根据死亡细胞占全部检测细胞的百分比的试验结果,来判断抗体与抗原反应的强度。
操作说明:
淋巴毒实验操作步骤
细胞分离:
1、取2ml供者的抗凝血(抗凝剂最好选择枸橼酸钠即ACD)。
2、用淋巴细胞分离液(国产、进口均可)或荧光免疫磁珠(ONE LAMBDA)。
3、 分离细胞后用McCoy s液或RPMI1640培养液悬浮细胞,细胞数为:大约2000/ml。
血清制备:
4、 无抗凝液的试管取受者5ml血。
5、 用水平式离心机离心2000rpm,10分钟,收集血清。
补体制备:
6、 将ONE LAMBDA公司的一类补体,用无菌水(4℃冷藏后最佳)溶解。
7、 完全溶解后分装(10-20ul/管),备用。注:这里只是ONE LAMBDA公司的补体效价结果,如使用其他补体不能保证结果。
实验步骤:
8、 准备一块TERASAKI空板。
9、 取供者细胞1ul,受者血清1ul,OLI补体1ul及5ul矿物油,分别加入空板孔中,加盖放入37℃水浴箱中孵育,1个小时。
10、1小时后取出反应板,在反应孔中再加入5ul胎盘蓝染液,加盖放入37℃水浴箱中孵育,1个小时。
11、1小时后显微镜下数细胞。
12、荧光免疫磁珠提取的细胞使用荧光终止剂5ul,加入终止剂后即可镜下观察,或放置数小时后观察均可。判定分数以NIH方法为准,按死细胞所占比例来定,1分阴性死细胞占1-10%,2分阴性死细胞占11-20%,4分阴性/阳性死细胞占21-50%,6分阳性死细胞占51-80%,8分阳性死细胞占81-100%。
结果判定:
显微镜下死细胞呈兰色状,活细胞为白色发亮,镜下用细胞计数器记数,算出死细胞与活细胞的比例,以百分比计算,其中10%以下为阴性可进行器官移植(肾脏、心脏、肝脏等),10%以上为阳性不能进行器官移植。
订购信息:
产品目录 | 产品说明 | 规格 |
兔补体和阳性质控血清 | ||
CABC-1D | 冻干一类补体--1ml | 1ml/瓶 |
CDR-1D | 冻干二类补体--1ml | 1ml/瓶 |
ALSG | 抗淋巴细胞阳性质控血清 | 1ml/瓶 |
IGg | IGg抗体 | 25人份/支 |
干燥淋巴细胞分离剂 | ||
LK-50-MN | 单核细胞分离剂 | 瓶 |
LK-50-T | B淋巴细胞分离剂 | 瓶 |
LK-50-B | T淋巴细胞分离剂 | 瓶 |
LKTB25 | T/B淋巴细胞分离剂 | 瓶 |
LKT25 | 淋巴细胞分离剂 | 瓶 |
免疫荧光磁珠分离剂 | ||
FB1-25 | 免疫磁珠T细胞分离剂-2.5ml | 2.5ml/瓶 |
FB1-100 | 免疫磁珠T细胞分离剂-10ml | 10ml/瓶 |
FB1-DEV | 免疫磁珠T细胞显影剂- 22ml | 22ml/瓶 |
FB2-25 | 免疫磁珠B细胞分离剂-2.5ml | 2.5ml/瓶 |
FB2-100 | 免疫磁珠B细胞分离剂-10ml | 10ml/瓶 |
FBA-MAG2+2 | 4孔磁性分离试管架 | 个 |
FBA-MAG6+6 | 12孔磁性分离试管架 | 个 |
PC1-500 | 冲洗磁珠用缓冲液 | 500ml/瓶 |
反应终止剂 | ||
SF-500 | 一步法终止剂-500ml | 500ml/瓶 |
SF-2000 | 一步法终止剂-2000ml | 2000ml/瓶 |
FQAE100 | 一步法荧光终止剂-100ml | 100ml/瓶 |
FQAE500 | 一步法荧光终止剂-500ml | 500ml/瓶 |
FQAE2000 | 一步法荧光终止剂-2000ml | 2000ml/瓶 |
泰萨奇板密封片 | ||
TIS-250 | 密封片(每箱250) | 250片/箱 |
TIS-1000 | 密封片(每箱1000) | 1000片/箱 |
TFS-250 | 荧光密封片(每箱250) | 250片/箱 |
TFS-1000 | 荧光密封片(每箱1000) | 1000片/箱 |
72孔泰萨奇板 | ||
TH72-100 | 72孔泰萨奇板(100块) | 100块/箱 |