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关于one Lambda产品

美国One Lambda公司是HLA领域中历史最久、规模最大、技术力量最雄厚的企业,主要产品包括:单克隆抗体配型试剂、HLA单抗干板、DNA检测试剂盒、PRA检测试剂盒和HLA领域各种专用仪器、试剂、磁珠、计算机分析软件等。近年来One Lambda公司与中国的交流不断加深,目前在中国器官移植领域建立了多个合作实验室,并同HLA领域的专家、技术人员建立了广泛的联系。有CFDA认证。

淋巴毒检测

产品原理

早在1956年Dr.Gorer等创建的补体依赖的淋巴细胞毒试验检测方法,用于检测小鼠同体抗体。1964年美国UCLA Dr.Terasaki等将此方法几经改良,并使之微量化后应用到HLA血清学检测实验中。本方法操作简便,结果可靠,重复性好,从方法学上为HLA的血清学研究敞开了大门。此方法沿用至今,成为一项被美国国立卫生研究院(NIH)认可的国际通用的标准技术,称之为“标准血清学分型方法(standard serology)”。

HLA细胞毒抗体属于免疫球蛋白IgG和IgM类型的抗体。此抗体在补体存在的情况下,能够结合到带有相应抗原的活淋巴细胞膜表面上,可以用数种方法观察此结果,其中最简单的方法是采用染色法(常用伊红或锥蓝)。染料进入死细胞后使死细胞体积增大并着色称为阳性结果,而活细胞不被着色成为阴性结果。一般根据死亡细胞占全部检测细胞的百分比的试验结果,来判断抗体与抗原反应的强度。





操作说明:

淋巴毒实验操作步骤

细胞分离:

1、取2ml供者的抗凝血(抗凝剂最好选择枸橼酸钠即ACD)。

2、用淋巴细胞分离液(国产、进口均可)或荧光免疫磁珠(ONE LAMBDA)。

3、 分离细胞后用McCoy s液或RPMI1640培养液悬浮细胞,细胞数为:大约2000/ml

血清制备:

4、 无抗凝液的试管取受者5ml血。

5、 用水平式离心机离心2000rpm10分钟,收集血清。

补体制备:

6、 将ONE LAMBDA公司的一类补体,用无菌水(4℃冷藏后最佳)溶解。

7、 完全溶解后分装(10-20ul/管),备用。注:这里只是ONE LAMBDA公司的补体效价结果,如使用其他补体不能保证结果。

实验步骤:

8、 准备一块TERASAKI空板。

9、 取供者细胞1ul,受者血清1ulOLI补体1ul5ul矿物油,分别加入空板孔中,加盖放入37℃水浴箱中孵育,1个小时。

101小时后取出反应板,在反应孔中再加入5ul胎盘蓝染液,加盖放入37℃水浴箱中孵育,1个小时。

111小时后显微镜下数细胞。

12、荧光免疫磁珠提取的细胞使用荧光终止剂5ul,加入终止剂后即可镜下观察,或放置数小时后观察均可。判定分数以NIH方法为准,按死细胞所占比例来定,1分阴性死细胞占1-10%2分阴性死细胞占11-20%4分阴性/阳性死细胞占21-50%6分阳性死细胞占51-80%8分阳性死细胞占81-100%

结果判定:

显微镜下死细胞呈兰色状,活细胞为白色发亮,镜下用细胞计数器记数,算出死细胞与活细胞的比例,以百分比计算,其中10%以下为阴性可进行器官移植(肾脏、心脏、肝脏等),10%以上为阳性不能进行器官移植。


订购信息:

产品目录

产品说明

规格

兔补体和阳性质控血清

CABC-1D

冻干一类补体--1ml

1ml/

CDR-1D

冻干二类补体--1ml

1ml/

ALSG

抗淋巴细胞阳性质控血清

1ml/

IGg

IGg抗体

25人份/

干燥淋巴细胞分离剂

LK-50-MN

单核细胞分离剂

LK-50-T

B淋巴细胞分离剂

LK-50-B

T淋巴细胞分离剂

LKTB25

T/B淋巴细胞分离剂

LKT25

淋巴细胞分离剂

免疫荧光磁珠分离剂

FB1-25

免疫磁珠T细胞分离剂-2.5ml

2.5ml/

FB1-100

免疫磁珠T细胞分离剂-10ml

10ml/

FB1-DEV

免疫磁珠T细胞显影剂- 22ml

22ml/

FB2-25

免疫磁珠B细胞分离剂-2.5ml

2.5ml/

FB2-100

免疫磁珠B细胞分离剂-10ml

10ml/

FBA-MAG2+2

4孔磁性分离试管架

FBA-MAG6+6

12孔磁性分离试管架

PC1-500

冲洗磁珠用缓冲液

500ml/

反应终止剂

SF-500

一步法终止剂-500ml

500ml/

SF-2000

一步法终止剂-2000ml

2000ml/

FQAE100

一步法荧光终止剂-100ml

100ml/

FQAE500

一步法荧光终止剂-500ml

500ml/

FQAE2000

一步法荧光终止剂-2000ml

2000ml/

泰萨奇板密封片

TIS-250

密封片(每箱250)

250/

TIS-1000

密封片(每箱1000)

1000/

TFS-250

荧光密封片(每箱250)

250/

TFS-1000

荧光密封片(每箱1000)

1000/

72孔泰萨奇板

TH72-100

72孔泰萨奇板(100块)

100/




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